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细胞凋亡
细胞凋亡

       细胞凋亡(Cell Apoptosis)是指为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序的死亡。细胞凋亡与细胞坏死不同,细胞凋亡不是一件被动的过程,而是主动过程,它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用。    

      细胞凋亡检测常用的方法为AnnexinV/PI双染法流式检测。其原理为:正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜内侧,但在细胞凋亡早期, PS从细胞膜内侧翻向外侧至膜表面。Annexin V是一种分子量为35~36kDCa2+依赖性磷脂结合蛋白,可以与磷脂酰丝氨酸特异性结合,将Annexin V进行荧光素(FITC)标记作为荧光探针,利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞早期凋亡的发生。碘化丙啶(propidine iodidePI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,无法进入活细胞内部,但对凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI 能够透过细胞膜而使细胞核红染。因此将Annexin V PI 匹配使用,就可以将凋亡早晚期的细胞以及死细胞区分开来。

细胞凋亡过程中染色体DNA发生断裂,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)利用脱氧核糖核苷酸末端转移酶(tdt)的作用将断裂缺口产生的DNA3'-oh与生物素相连接,使断裂DNA染色,从而分析凋亡细胞。

 

应用领域

1,免疫学应用,胸腺细胞成熟过程的凋亡,活化诱导的细胞凋亡;

2,临床应用,HIV感染发病机制研究,肿瘤发生机制研究;

3,自身免疫疾病研究。

 

服务流程

1,细胞培养,调整细胞悬液浓度后接种细胞培养板

2,药物处理

3,相关检测时间点细胞收集

4, Annexin V-FITCPI染料避光孵育

5上机流式检测

6,数据分析与结果展示

 

样本要求

1,需要用户提供待检测细胞,细胞数大于106

2,提供药品,药物作用方式(浓度以及时间)。

3,符合样品运输要求。

 

 
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