所谓稳定细胞系,即外源质粒DNA整合到宿主细胞染色体上, 使宿主细胞可长期表达目的蛋白。稳定细胞株构建,一般是将外源DNA克隆到具有某种抗性或选择基因的载体上,载体转染宿主细胞,外源基因被整合到宿主细胞染色体中,用载体中所含的选择标志进行筛选,筛选得到可稳定表达目的蛋白的细胞株。高质量的稳定细胞系在生物学研究中扮演着非常重要的角色,包括基因功能研究、重组抗体、药物开发等。
流程
1. 基因亚克隆及表达载体的构建
2. 细胞浓度测定
3. 细胞培养与载体转染
4. 使用抗生素或者流式筛选对细胞进行筛选
5. 稳定细胞株筛选结果鉴定
客户提供
目的基因信息,细胞信息,载体信息。
结果交付
1. 转染好的稳转细胞1瓶(25T)
2. 提供筛选过程的实验报告及验证结果图(有灰度分析要求的请提前备注)
3. 若需要质粒载体,请提前备注